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更新時(shí)間:2025-11-03
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大鼠血清蛋白譜與小鼠、人源抗體交叉位點(diǎn)少,F(xiàn)c 段同源性僅 62 %。BMS0100 采集 8 周齡 SPF 級(jí)大鼠心臟血,低溫離心去纖維蛋白,56 ℃ 30 min 補(bǔ)體滅活,0.1 μm 三級(jí)過(guò)濾后 IgG 濃度鎖定 9.2 mg/mL,比兔血清低 20 %,非特異占位能力反而更高,直接把膜空白區(qū)占滿,一抗二抗的無(wú)差別吸附失去落腳點(diǎn)。
內(nèi)毒素:< 0.5 EU/mL,腹腔注射級(jí)標(biāo)準(zhǔn),原代巨噬細(xì)胞封閉 2 h 不誘導(dǎo) TNF-α 上升。
血紅蛋白:≤ 0.3 mg/dL,520 nm 吸光度 0.015,熒光 WB 的 Cy5 通道背景接近基線。
pH 7.2–7.4,滲透壓 300 mOsm/kg,與 D-PBS 等滲,細(xì)胞封閉后形態(tài)不變圓。
生物負(fù)載:0 CFU/10 mL,開(kāi)瓶后 4 ℃ 60 天增菌培養(yǎng)陰性,寫(xiě)進(jìn)實(shí)驗(yàn)室主文件不用每周過(guò)濾。
PVDF 膜 4 ℃ 封閉過(guò)夜,一抗小鼠抗人 β-actin,二抗羊抗鼠 800CW:
| 封閉劑 | 800 CW 背景灰度 | 信噪比 |
|---|---|---|
| 5 % BSA | 950 | 8 |
| 5 % BMS0100 | 120 | 65 |
| 背景直接砍掉 87 %,Odyssey 遠(yuǎn)紅通道 700 kDa 蛋白marker 附近無(wú)拖尾,單細(xì)胞定量重復(fù) CV<3 %。 |
“Membranes were blocked with 5 % Normal Rat Serum (BMS0100, Lot# R202506, IgG 9.2 mg/mL, endotoxin < 0.5 EU/mL) in TBST for 16 h at 4 °C." 一行把來(lái)源、純度、內(nèi)毒素、封閉時(shí)長(zhǎng)全部鎖死,編輯找不到返修借口。
WB 封閉:1:20 稀釋,100 mL 工作液封 20 張迷你膜,單張成本 2.5 元。
流式封閉:原液 100 μL/10^6 細(xì)胞,4 ℃ 15 min,大鼠、小鼠、人源抗體混搭無(wú)交叉。
抗體稀釋:2 % BMS0100 + 0.02 % NaN?,一抗 4 ℃ 回收 7 次,效價(jià)下降 < 5 %。
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