細胞身份溯源標準

STR-禽源指紋圖譜必須≥16個位點匹配度≥98%，同時線粒體COI基因序列與Anas platyrhynchos參考序列差異<0.3%。第三方復核由AAVCL（亞洲禽類細胞庫）執(zhí)行，每批次出具可追溯報告編號。

永生化基因插入位點圖譜

SV40大T抗原整合位點限定于5號染色體短臂39.8-40.1 Mb區(qū)間，qPCR檢測拷貝數(shù)2±0.2 copies/cell。插入位點偏離區(qū)段即視為非標準品，禁止進入市場。

無菌與病毒安全閾值

細菌、真菌、支原體三級檢測：

• 細菌16S rRNA qPCR Ct≥35；

• 真菌ITS qPCR Ct≥35；

• 支原體16S rRNA qPCR Ct≥38。

鴨病毒性腸炎病毒(DEV)、H9N2病毒(AIV)實時熒光PCR必須陰性，Ct≥40。

染色體核型穩(wěn)定性

連續(xù)培養(yǎng)至P20代，核型仍為2n=78，結(jié)構(gòu)畸變率<3%。G帶標準圖由ISCN(2020)命名體系發(fā)布，畸變率超限即觸發(fā)退市程序。

功能表型基準值

• TEER值：標準培養(yǎng)條件下≥800 Ω·cm2；

• 堿性磷酸酶活性：≥120 mU/mg protein；

• 黏液分泌量：Alcian blue法≥1.5 μg/10? cells/24 h。

任一項偏離±15%即判定批次失效。

培養(yǎng)基與添加劑配方

DMEM/F12為基礎(chǔ)，必須添加：

• ITS-X 1×；

• 鴨血清2%，須γ-輻照滅活；

• 重組鴨EGF 10 ng/mL；

• 丙酮酸鈉 1 mM。

任何成分替換需重新提交標準驗證。

凍存與復蘇存活率紅線

凍存液：92.5% K-SR + 7.5% DMSO。

程序降溫：-1 ℃/min至-80 ℃，液氮儲存。

復蘇存活率≥85%，24 h貼壁率≥90%。低于指標整批召回。

標簽與文檔強制要求

包裝外標簽：細胞名稱、P代次、STR編號、無菌二維碼。

隨箱文件：

• 細胞系來源授權(quán)書；

• 第三方質(zhì)檢報告原件；

• 培養(yǎng)基配方表；

• 運輸溫度曲線圖。

缺失任一文件視為不合規(guī)批次。